总结一篇培养心肌细胞的同行经验,这里好比备忘录式的,所以没有人称的区别了。

40h心肌细胞已经贴壁了，换液不会将细胞换掉的，一般48h搏动现象就比较明显了。辨别心肌细胞与成纤维细胞除了观察有无搏动，还可通过免疫细化的方法加以区别。

建议调整消化步骤，当然首先要保证取材快，我取出心脏时，洗心脏时，不用我去碰，都会自己喷血。乳鼠2天的好，1天和3天，我认为不行。胎鼠的我也养过，还是养神经元比较好。

细胞需要差速贴壁培养,因为消化后有心肌成纤维细胞和心肌细胞,成纤维细胞2小时就贴壁完成,因此可以通过差速贴壁的方式，让成纤维先贴壁然后吸上清再种到一个新的平皿，预先铺明胶促进贴壁！

首先用0.8％胰酶4度消化过夜 第二天用胶原酶34度消化就可以。

你养得是什么心肌细胞啊，要消化这么久，我都是出生24小时的SD大鼠，最多消化半小时吧，还用得0.025%的胰酶,4度过夜,效果很好。也是SD大鼠,小鼠也是这个条件.

我想问下，细胞搏动是如何判断的，是要一簇细胞一起搏动还是单个细胞都能搏动呢？还有想请问下大家，取原代的时候撕去了心包膜了么？因为心包膜里的纤维细胞较多，但是这个步骤不好操作啊

有单个细胞的搏动也有成簇的搏动，个人认为成簇的搏动更具有说服力。
尽量撕去心包膜吧，如果弄不干净的话1.5-2小时的差速或通过添加Brdu也可将大部分的成纤维细胞去除。

搏动是很明显的 整体一起搏 不过不处理确实不是很厉害 如果用PE处理就使劲动呵呵，从图上看挺象的，成纤维细胞是典型的梭状

我就是用含BRDU的培养基 差速贴壁2小时，效果很好

我是用的37度水浴，多次消化，效果很好。

请问PE是啥啊？BRDU的性状是如何的？粉末还是液体呢，贵不，我们实验经费有限啊

PE苯肾上腺素（phenylephrine）要看自己实验的情况，在这里仅仅是给予心肌细胞一种处理或刺激因素，要根据自己的实验设计来，没必要添加。

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